زعفران مهار تکثیر کارسینوم هپاتوسلولار از طریق القای آپوپتوز سلولی

پس‌زمینه:

سرطان کبد همچنان سومین علت مرگ و میر ناشی از سرطان در سراسر جهان است. هدف از این مطالعه بررسی اثر زعفران بر روی خط سلولی سرطان کبد QGY-7703 و مکانیسم مولکولی آن بود. روش‌ها: رشد سلول‌ها با آزمایش MTT (3-(4,5-دی‌متیل‌تيازول-2-يل)-2,5-دی‌فنیل تترازولیوم بروماید) سنجیده شد و چرخه سلولی با استفاده از فلوسیتومتری ارزیابی گردید. علاوه بر این، آپوپتوز سلول‌ها با رنگ‌آمیزی Annexin V/PI (پروپیدیوم یدید) تحلیل شد و شکل‌شناسی سلول‌های پیری با رنگ‌آمیزی β-گالاکتوزیداز تحت میکروسکوپ ارزیابی شد. همچنین، کیت ELISA (آزمایش ایمنی متصل به آنزیم) برای ارزیابی فعالیت تلومراز استفاده شد. علاوه بر این، از واکنش زنجیره‌ای پلیمراز همراه با رونویسی معکوس (RT-PCR) و تحلیل وسترن بلات برای بررسی سطوح بیان mRNA و پروتئین به‌ترتیب استفاده شد.

نتایج:

درمان با زعفران در سلول‌های QGY-7703 می‌توانست به طور قابل‌توجهی رشد سلولی را مهار کند، چرخه سلولی را در مرحله G0/G1 متوقف نماید و آپوپتوز سلولی را القا کند.علاوه بر این، درمان با زعفران می‌تواند به وضوح فعالیت تلومراز و سطح hTERT در سلول‌های QGY-7703 را کاهش دهد. علاوه بر این، نسبت Bax/Bcl-2 افزایش یافته و بیان P21 در سلول‌های درمان شده با زعفران افزایش یافته است. علاوه بر این، ما مشاهده کردیم که تعداد سلول‌های پیری به طور قابل توجهی افزایش یافته و مورفولوژی سلول‌ها پس از درمان با زعفران به وضوح تغییر کرده است.
نتیجه‌گیری:
مصرف زعفران ممکن است شواهد تجربی‌ای برای اثر مهاری زعفران بر تکثیر سلول‌های QGY-7703 فراهم کند و نشان دهد که زعفران ممکن است کاربرد بالقوه‌ای برای درمان سرطان کبد داشته باشد.

Background:
Liver cancer remains the third leading cause of cancer-related mortality worldwide. The aim of this study was to explore the effect of saffron on liver cancer cell line QGY-7703 and the underlying molecular mechanism.
Methods:
Cell growth was detected by MTT (3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide) assay and cell cycle was assessed by flow cytometry. Besides, cell apoptosis was analyzed by Annexin V/PI (Propidium Iodide) staining, and the senescent cells morphology staining of β-galactosidase was evaluated by microscopy. In addition, ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay) Kit was used to assess the activity of telomerase. Moreover, reverse transcription-PCR (polymerase chain reaction) and Western blot analysis was applied to detect mRNA and protein expression levels, respectively.
Results:
Saffron treatment in QGY-7703 cells could significantly inhibit cell growth, arrest cell cycle in the G0/G1 phase, and induce cell apoptosis. Besides, the treatment of saffron could obviously decrease telomerase activity and hTERT level in QGY-7703 cells. In addition, enhanced Bax/Bcl-2 ratio and increased expression of P21 were found in saffron-treated cells. Moreover, we found that the number of senescent cells increased dramatically and the morphology of cells changed obviously after saffron treatment.
Conclusions:
Saffron administration may provide some experimental evidence for the inhibitory effect of saffron on the proliferation of QGY-7703 cells, suggesting that saffron may have potential utility for the treatment of liver cancer.