تلاش‌های ریزازدیادی درون شیشه‌ای ادویه با ارزش زعفران (Crocus sativus L.)

زعفران (Crocus sativus L.)، یک گونه سه‌مکانی است که در طبیعت وجود دارد و از طریق غده‌ها به‌طور رویشی تکثیر می‌شود. با توجه به نرخ بسیار پایین تکثیر به‌وسیله این روش سنتی، میکروتکثیر از طریق تکنیک‌های کشت بافت ممکن است یک راه جایگزین برای مولد کردن آن باشد. در این زمینه، این پژوهش به منظور دستیابی به یک پروتکل کارآمد برای این گونه جالب انجام شده است. برای جوانه‌زنی جانبی، جوانه‌های آپیکال و جانبی روی محیط MS حاوی غلظت‌های مختلفی از 2.4-D (2,4-dichlorophenoxyacetic acid) و BAP (6-benzylaminopurine) کشت داده شدند. آنها بعد از تقریبا 15 روز انکوباسیون شروع به جوانه‌زنی کردند. بهترین ترکیب برای توسعه جوانه‌ها 1 میلی‌گرم در لیتر BAP و 1 میلی‌گرم در لیتر 2.4-D بود.

برای ارگان‌ژنز ناخواسته، بخش‌های غده روی محیط MS حاوی 2.4-D یا NAA به‌همراه BAP کشت داده شدند.برای تمایز جوانه، کالی‌ها در محیط MS که با غلظت‌های مختلفی از برخی تنظیم‌کننده‌های رشد گیاهی تغذیه شده بود، انکوبه شدند. BAP به تنهایی یا ترکیب شده با NAA بهترین هورمون برای تکثیر جوانه بود. القای کُرم در محیط MS نیمه غلیظ حاوی 30 گرم در لیتر ساکاروز و مکمل شده با ترکیب‌های مختلفی از سیتوکینین‌ها (BAP، TDZ) و اوکسین‌ها (IAA، NAA و IBA) انجام شد. بهترین نتیجه در جوانه‌هایی که در تاریکی مداوم در محیط MS نیمه غلیظ خالی از تنظیم‌کننده‌های رشد گیاهی کشت داده شده بودند، به دست آمد.

“Saffron (Crocus sativus L.), a steril triploid specie in nature, is propagated by vegetative means through corms. Considering the very low propagation rate by this conventional method, micropropagation via tissue culture techniques may constitute an alternative way for its multiplication. In this regard, the present work has been realized in order to achieve an efficient protocol for this interesting specie. For axillary budding, apical and lateral buds were cultured on MS medium supplemented with different concentrations of 2.4-D (2,4-dichlorophenoxyacetic acid) and BAP (6-benzylaminopurine). They started sprouting after approximately 15 days of incubation.

The best combination for buds development was 1 mg/l BAP and 1 mg/l 2.4-D. For adventituous organogenesis, corm segments were cultured on MS medium supplemented with 2,4-D or NAA in combination with BAP. Callogenesis has been observed after 2 weeks. The highest rate (80%) of callus formation was registered with 0.25 mg/l 2,4-D and 1 mg/l BAP. For shoot differentiation, calli were incubated on MS medium supplemented with various concentrations of some different plant growth regulators.

BAP alone or combined with NAA was the best hormone for shoot multiplication. Corm induction has been performed on the half strength MS medium containing 30g/l of sucrose and supplemented with different combination of cytokinins (BAP, TDZ) and auxins (IAA, NAA and IBA). The best result was obtained in shoots cultured under continuous dark on half strength MS medium free from plant growth regulators.”