زعفران (Crocus Sativus) و ترکیب فعال آن کروسین، فعال‌سازی اندوتلیال و تعامل مونوسیت-سلول‌های اندوتلیال را در سلول‌های اندوتلیال شریان کرونر انسان تحریک‌شده مهار می‌کند

زعفران یا Crocus sativus L. نشان داده است که اثرات ضد آترواسکلروتیک دارد. با این حال، اثرات آن بر رویدادهای کلیدی در آترزینز مانند فعال‌سازی اندوتلیالی و اتصال مونوسیت‌ها به سلول‌های اندوتلیالی در مدل آزمایشگاهی تحریک شده با لیپولیزوساکاریدها (LPS) به‌طور گسترده‌ای مورد مطالعه قرار نگرفته است.هدف: بررسی اثرات زعفران و ترکیب بیواکتیو آن، کروستین، بر بیان ژن و پروتئین نشانه‌گذارهای فعال‌سازی اندوتلیالی در سلول‌های اندوتلیالی شریان کرونری انسانی (HCAECs) تحریک شده با LPS.

روش‌شناسی: HCAECها با غلظت‌های مختلف عصاره‌های آبی اتانولی زعفران و کروستین در کنار LPS انکوبه شدند. بیان پروتئین و ژن نشانه‌گذارهای فعال‌سازی اندوتلیالی به ترتیب با استفاده از ELISA و qRT-PCR اندازه‌گیری شد. چسبندگی مونوسیت‌ها به HCAECها با رنگ‌آمیزی رز بنگال تشخیص داده شد. آزمون متیل‌تیازول-تیرازولیوم برای ارزیابی اثرات سمیتی زعفران و کروستین انجام شد.نتایج نشان داد که زعفران و کروسین به ترتیب تا 25.0 و 1.6 میکروگرم در میلی لیتر >85% بقای سلول را نشان دادند. درمان با زعفران پروتئین‌های sICAM-1، sVCAM-1 و E-selectin (غلظت‌ها: 3.13، 6.25، 12.5 و 25.0 میکروگرم در میلی لیتر؛ 3.13، 12.5 و 25.0 میکروگرم در میلی لیتر؛ 12.5 و 25.0، به ترتیب) و بیان ژن‌ها (غلظت: 12.5 و 25.0 میکروگرم در میلی لیتر؛ 3.13، 6.25 و 25.0 میکروگرم در میلی لیتر؛ 6.25، 12.5 و 25.0؛ به ترتیب) را کاهش داد.

به طور مشابه، درمان با کروسین نیز بیان پروتئین‌های sICAM-1، sVCAM-1 و E-selectin (غلظت: 0.2، 0.4، 0.8 و 1.6 میکروگرم در میلی لیتر؛ 0.4، 0.8 و 1.6 میکروگرم در میلی لیتر؛ 0.8 و 1.6 میکروگرم در میلی لیتر؛ به ترتیب) و بیان ژن (غلظت: 0.8 و 1.6 میکروگرم در میلی لیتر؛ 0.4، 0.8 و 1.6 میکروگرم در میلی لیتر؛ و 1.6 میکروگرم در میلی لیتر، به ترتیب) را کاهش داد. تعاملات مونوسیت-سلول اندوتلیال در پی درمان با زعفران در غلظت‌های 6.3، 12.5 و 25.00 میکروگرم در میلی لیتر کاهش یافت. به همین ترتیب، کروسین نیز تعاملات سلولی را در غلظت‌های 0.04، 0.08 و 1.60 میکروگرم در میلی لیتر سرکوب کرد.نتیجه‌گیری: زعفران و کروستین دارای اثرات مهاری قوی بر فعال‌سازی اندوتلیال و تعامل سلول‌های اندوتلیالی و مونوسیت‌ها هستند که نشان‌دهنده خواص پتانسیل ضد آترواسکلروزی آنها است.

“Crocus sativus L. or saffron has been shown to have anti-atherogenic effects. However, its effects on key events in atherogenesis such as endothelial activation and monocyte-endothelial cell binding in lipolysaccharides (LPS)-stimulated in vitro model have not been extensively studied.

Objectives To investigate the effects of saffron and its bioactive derivative crocin on the gene and protein expressions of biomarkers of endothelial activation in LPS stimulated human coronary artery endothelial cells (HCAECs).

Methodology HCAECs were incubated with different concentrations of aqueous ethanolic extracts of saffron and crocin together with LPS. Protein and gene expressions of endothelial activation biomarkers were measured using ELISA and qRT-PCR, respectively. Adhesion of monocytes to HCAECs was detected by Rose Bengal staining. Methyl-thiazol-tetrazolium assay was carried out to assess cytotoxicity effects of saffron and crocin.

Results Saffron and crocin up to 25.0 and 1.6 μg/ml respectively exhibited >85% cell viability. Saffron treatment reduced sICAM-1, sVCAM-1 and E-selectin proteins (concentrations: 3.13, 6.25, 12.5 and 25.0 μg/ml; 3.13, 12.5 and 25.0 μg/ml; 12.5 and 25.0, respectively) and gene expressions (concentration: 12.5 and 25.0μg/ml; 3.13, 6.25 and 25.0 μg/ml; 6.25, 12.5 25.0; respectively). Similarly, treatment with crocin reduced protein expressions of sICAM-1, sVCAM-1 and E-selectin (concentration: 0.2, 0.4, 0.8 and 1.6 μg/ml; 0.4, 0.8 and 1.6 μg/ml; 0.8 and 1.6 μg/ml; respectively] and gene expression (concentration: 0.8 and 1.6 μg/ml; 0.4, 0.8 and 1.6 μg/ml; and 1.6 μg/ml, respectively). Monocyte-endothelial cell interactions were reduced following saffron treatment at concentrations 6.3, 12.5 and 25.00 μg/ml. Similarly, crocin also suppressed cellular interactions at concentrations 0.04, 0.08, 1.60 μg/ml.

Conclusion Saffron and crocin exhibits potent inhibitory action for endothelial activation and monocyte-endothelial cells interaction suggesting its potential anti-atherogenic properties.”