زعفران دارای اثر ضد تکثیری تقویت شده against سلول‌های سرطان کولورکتال با نقص ترمیم عدم تطابق DNA است

پس‌زمینه: سرطان کولورکتال (CRC) یکی از شایع‌ترین سرطان‌ها در جهان است. یک زیرگروه از CRC با ژن‌های معیوب ترمیم عدم تطابق (dMMR) مرتبط است. زعفران نقش‌های حفاظتی بالقوه زیادی در برابر بدخیمی‌های روده بزرگ دارد، با این حال، این نقش‌ها در زمینه dMMR مورد بررسی قرار نگرفته‌اند. در این مطالعه، هدف ما بررسی تأثیرات زعفران در خطوط سلولی CRC با dMMR بود.روش‌ها: استخراج‌های خام زعفران و ترکیب‌های خاص (کروستین، کروکتین و سافرانال) در خطوط سلولی سرطان کولورکتال HCT116، HCT116+3 (وارد شده MLH1)، HCT116+5 (وارد شده MH3) و HCT116+3+5 (وارد شده MLH1 و MSH3) استفاده شد.

CDC25b، p-H.H2AX، TPDP1، و GAPDH با استفاده از روش وسترن بلات تجزیه و تحلیل شدند. چرخه سلولی با FACS بررسی شد. رشد و سمیت سلولی با MTT تجزیه و تحلیل شد. آزمایش‌های زخم و مهاجرت نیز انجام شد.نتایج: عصاره‌های زعفران از رشد در سلول‌های روده‌ای که MMR ناقص دارند (HCT116) در مقایسه با MMR کامل جلوگیری کردند. آزمایش بهبود زخم نشان می‌دهد که سلول‌های MMR ناقص بهتر از سلول‌های MMR کامل عمل می‌کنند. بیان CDC25b و TDP1 در سلول‌های MMR کامل در مقایسه با سلول‌های MMR ناقص افزایش یافته است، در حالی که H2AX به طور قابل توجهی در هر دو نوع سلول به ویژه در غلظت‌های بالای ۱۰ میلی‌گرم در میلی‌لیتر زعفران به صورت وابسته به غلظت افزایش یافته است (پس از نرمال‌سازی با GADPH به عنوان کنترل).

کاهش در تکثیر و تحرک سلولی ممکن است به دلیل توقف چرخه سلولی در مرحله G2 باشد نه به دلیل آپوپتوز. ترکیبات فعال اصلی زعفران، سافرانال و کروcin اثرات کلی عصاره‌های زعفران را تولید کرده‌اند اما با نتایج کمتر. نتیجه‌گیری: اثرات ضد تکثیری و بهبود زعفران در سلول‌های دارای ژن‌های ناقص MMR MLH1 و MSH3 قابل توجه است.این اثر ممکن است پیامدهای درمانی و مزایایی برای تومورهای CRC MSI داشته باشد که به طور کلی برای درمان مبتنی بر 5FU توصیه نمی‌شوند.

“Background: Colorectal cancer (CRC) is one of the most common cancers worldwide. A subtype of CRC is associated with defective mismatch repair (dMMR) genes. Saffron has many potentially protective roles against colon malignancy, however, these roles in the context of of dMMR have not been explored. In this study, we aimed to study the effects of saffron in CRC cell lines with dMMR.

Methods: Saffron crude extracts and specific compounds (crocin, crocetin and safranal) were used in colorectal cancer cell lines HCT116, HCT116+3 (inserted MLH1), HCT116+5 (inserted MH3) and HCT116+3+5 (Inserted MLH1 and MSH3). CDC25b, p-H.H2AX, TPDP1, and GAPDH were analyzed by Western blot. Cell cycle was analyzed by FACS. Proliferation and cytotoxicity were analyzed by MTT. Wound and migration assays were also performed.

Results: Saffron crudes restricted the proliferation in colon cells with deficient MMR (HCT116) compared to proficient MMR. Wound healing assay indicates that deficient MMR cells are doing better than proficient MMR cells. The expression of CDC25b and TDP1 were upregulated in proficient MMR cell compared to deficient MMR cell, while H2AX was significantly upregulated in both cells type particularly at >10 mg/ml saffron in a concentration-dependent manner (after normalization with GADPH as control).The reduction in cellular proliferation and motility might be due to cell cycle arrest at G2-phase rather than to apoptosis.

The major active saffron compounds, safranal and crocin reproduced total saffron crudes effects but with lesser outcome.Conclusion: Saffron’s anti-proliferative and healing effects is significant in cells with deficient MMR MLH1 and MSH3 genes. This effect may have a therapeutic implications and benefits for the CRC MSI tumors that are generally not recommended for 5FU-based treatment.”