یک گردش کار قوی برای جنین‌زایی غیرمستقیم رویشی و تولید پیازچه در زعفران (Crocus sativus L.) و متحدان وحشی آن؛ C. caspius و C. Speciosus

“زعفران و خویشاوندان وحشی آن از اهمیت قابل توجهی برخوردارند. پروتکل‌های کارآمدی برای ضدعفونی و تولید درون شیشه‌ای پیازچه توسعه داده شد. یک دستورالعمل ضدعفونی بسیار کارآمد و یک پروتکل کم‌هزینه عاری از TDZ برای تولید پیازچه در سه گونه Crocus با موفقیت توسعه یافت. محیط کشت MS حاوی ۱۰.۱۸ میکرومول ۲,۴-D و ۴.۴۴ میکرومول BAP برای القای کالوس و جنین رویشی موثرترین بود. بالاترین فرکانس تبدیل و حداکثر وزن پیازچه در محیط MS حاوی ۵.۳۷ میکرومول NAA و ۸.۸۸ میکرومول BAP به دست آمد. بیان ژن SERK در کالوس‌های جنین‌زا به طور معنی‌داری بالاتر بود. این دستورالعمل کم‌هزینه و آسان، یک گردش کار امیدوارکننده برای ریزازدیادی و تولید انبوه پیازچه‌های یکنواخت و عاری از بیماری گونه‌های Crocus، و همچنین بستری برای حفاظت و ویرایش ژن موثر با استفاده از CRISPR-Cas9 پیشنهاد می‌دهد.

Saffron (Crocus sativus L.) and its wild relatives, Crocus caspius and Crocus speciosus are of considerable significance. Efficient protocols were developed for disinfection and in vitro production of cormlets. A highly efficient disinfection recipe and a low-cost TDZ-free protocol have been successfully developed for in vitro cormlet production in three Crocus species. MS medium containing 10.18 μM 2,4-D + 4.44 μM BAP was most efficient for callus and somatic embryo induction. The highest conversion frequency and maximum cormlet weight were achieved in MS containing 5.37 μM NAA + 8.88 μM BAP. The SERK expression was significantly higher in embryogenic calli. The current low-cost and easy-to-use recipe suggests a promising in vitro propagation workflow for mass production of uniform pathogen-free cormlets of Crocus species, as well as a platform for conservation and effective gene editing using CRISPR-Cas9.