اثر مراحل رشدی کورم، نوع محیط کشت و تنظیم‌کننده‌های رشد گیاهی در القای کالوس زعفران

هدف: کارایی القای مریستم به عنوان منبع ترکیبات زیست‌فعال، یک گام حیاتی در کشت سلول‌های معلق برای تولید تجاری متابولیت‌های ثانویه مهم است. یکی از عوامل اصلی که بر کارایی مریستم تأثیر می‌گذارد، مرحله رشد و توسعه قطعات گیاهی است. از طرف دیگر، اعلام شده است که بهینه‌سازی ترکیب محیط کشت تأثیر قابل‌توجهی بر کالوجنز و افزایش زیست‌توده دارد.

روش تحقیق: هدف از این مطالعه ارزیابی مراحل مختلف رشد غده زعفران به عنوان منبع تهیه اکسپلانت (غده‌های نابالغ و بالغ)، ترکیبات هورمون‌های رشد گیاهی (PGRs) (اسید نافتالنی استیک (NAA)، اسید 2,4-دیکلروفنوکسی استیک (2,4-D)، بنزیل‌آدنین (BA) و کینتین (Kin)) و نوع محیط کشت (محیط گامبورگ (B5) و محیط موراشیگه و اسکوگ (MS)) در القای مریستم غده زعفران به منظور افزایش زیست‌توده سلولی بود.محیط‌های کشت با ترکیبات مختلفی از 1-نفتالنی‌استیک اسید یا 2،4-دی‌کلروفنوکسی‌استیک اسید (2، 4، 8 میلی‌گرم بر لیتر) به عنوان آکسین و 6-بنزیل‌آدنین یا کینتین (1، 4، 8 میلی‌گرم بر لیتر) به عنوان سیتوکینین تکمیل شدند.

یافته‌ها: نتایج نشان داد که غده‌های بالغ برداشت‌شده در ماه مه بهترین مرحله تکاملی برای کالوس‌زایی را داشتند. بیشترین تشکیل کالوس در محیط B5 با افزودن 2،4-دی‌کلروفنوکسی‌استیک اسید (4 میلی‌گرم بر لیتر) و کینتین (1 میلی‌گرم بر لیتر) با وزن تازه 2.61 گرم ثبت شد.

محدودیت‌ها: محدودیتی برای گزارش وجود ندارد. اصالت/ارزش: این پروتکل برای نمونه‌برداری از اکسپلان و تشکیل کالوس نشان داد که منابع مناسبی از مواد گیاهی برای مطالعه‌های بعدی در تولید ترکیبات بیواکتیو از طریق کشت‌های سلولی معلق فراهم می‌کند.

Purpose: The efficiency of callus induction as source of bioactive compound is a critical step in the cell suspension culture for commercial production of important secondary metabolites. One of the main factors affecting callus efficiency is the developmental stage of explants. On the other hands, it has been declared that the optimization of medium composition has a significant influence on callogenesis and increment of biomass.

Research method: The aim of this study was the evaluation of different developmental stages of saffron corms as a source of explant preparation (immature and mature corms), plant growth regulators (PGRs) combinations (1-Naphthaleneacetic acid (NAA); 2, 4-dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D); 6-Benzyladenine (BA) and kinetin (Kin)) and type of medium (Gamborg (B5) medium and Murashige and Skoog (MS) medium) in callus induction in saffron corms to increase cell biomass. The media were supplemented with different combinations of 1-Naphthaleneacetic acid or 2, 4-dichlorophenoxyacetic acid (2, 4, 8 mgL-1) as auxins and 6-Benzyladenine or kinetin (1, 4, 8 mgL-1) as cytokinin.

Findings: The results showed that mature corms harvested in May had the best developmental stage for callogenesis. The maximum callus formation was recorded in B5 medium supplemented with 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (4 mgL-1) and kinetin (1 mgL-1) with 2.61 g fresh weight.

Limitations: No limitations to report. Originality/Value: This protocol for sampling explant and callus formation was found to make suitable sources of plant material for further study in production of bioactive compounds via cell suspension cultures.