سافرنال کولیت القا شده توسط دکسترن سولفات سدیم را تسکین می‌دهد و التهاب واسطه شده توسط ماکروفاژها را سرکوب می‌کند

مقدمه: گل زعفران (Crocus sativus) به طور گسترده‌ای در چین، ایران و هند برای رنگ‌آمیزی و به‌عنوان افزودنی غذایی و گیاه دارویی استفاده می‌شود. سافرنال، به عنوان یکی از مؤلفه‌های اصلی زعفران، مسئول عطر آن است و گزارش شده که دارای خواص ضدسرطانی، آنتی‌اکسیدانی و ضد التهابی می‌باشد.
هدف: در این مطالعه، اثرات ضد التهابی سافرنال در سلول‌های RAW264.7، ماکروفاژهای مشتق شده از مغز استخوان (BMDMs) و موش‌های مبتلا به کولیت القا شده با دکستران سولفات سدیم (DSS) مورد بررسی قرار گرفت.
روش‌ها: سمیت سافرنال با استفاده از آزمایش MTT تعیین شد. اثر مهاری نیتریک اکسید (NO) و سطوح سنتاز اکسید نیتریک القایی (iNOS) و سیکلواکسیژناز-2 (COX-2) در سلول‌های RAW264.7 و BMDMs ارزیابی شد. اثر مهاری سایتوکین‌های پیش التهابی و بیان mRNA اینترلوکین-6 (IL-6)، فاکتور نکروز تومور آلفا (TNF-α)، مسیرهای کلاسیک التهابی (MAPK و NF-κB) و عوامل انتقال هسته‌ای AP-1 و NF-κB p65 مورد بررسی قرار گرفت.اثرات ضد التهابی درون‌تنی سافرانال در مدل کولیت القا شده با DSS مورد ارزیابی قرار گرفت. برای القای کولیت در موش‌ها از DSS با غلظت 3.5٪ با یا بدون سافرانال به مدت 7 روز استفاده شد؛ وزن و شاخص فعالیت بیماری (DAI) روزانه ثبت شد. در پایان آزمایش، کولون، گره‌های لنفاوی مزانتریک (MLNs) و طحال برای تحلیل سیتومتری جریانی، ELISA و وسترن بلات جمع‌آوری شدند. نتایج: سافرانال تولید NO، iNOS و COX-2 را در سلول‌های RAW264.7 و BMDM تحریک شده با لیپوپلی‌ساکارید (LPS) مهار کرد. سافرانال تولید و بیان mRNA IL-6 و TNF-α را در رده سلولی RAW264.7 کاهش داد و فسفریلاسیون و انتقال هسته‌ای اجزای مسیرهای MAPK و NF-κB را مهار کرد. سافرانال علائم بالینی را در مدل کولیت القا شده با DSS کاهش داد و هیستولوژی کولون نشان‌دهنده کاهش شدت التهاب، عمق درگیری التهابی و آسیب کریپت‌ها بود.رنگ‌آمیزی ایمنوهیستوشیمیایی و فلوسیتومتری نشان داد که نفوذ ماکروفاژها در بافت‌های روده بزرگ و تعداد ماکروفاژها در گره‌های لنفاوی مزانتریک و طحال کاهش یافته است. سطح IL-6 و TNF-α روده بزرگ در موش‌های مبتلا به کولیت که با سافرانال درمان شده بودند نیز کاهش یافت. این مطالعه فعالیت ضدالتهابی سافرانال را روشن می‌کند که می‌تواند کاندیدایی برای درمان سندرم روده التهابی (IBD) باشد.

Introduction: Crocus sativus (saffron) is widely used in China, Iran, and India for dyeing and as a food additive and medicinal plant.Safranal, as one of the main constituents of saffron, is responsible for its aroma and has been reported to have anticancer, antioxidant, and anti-inflammation properties.
Objective: In this study, we investigated the anti-inflammatory effects of Safranal in RAW264.7 cells, bone marrow-derived macrophages (BMDMs), and dextran sulfate sodium (DSS)-induced colitis mice.
Methods: Safranal toxicity was determined using an MTT assay. We evaluated the inhibitory effect of nitric oxide (NO) and levels of inducible nitric oxide synthase (iNOS) and cyclooxygenase-2 (COX-2) in RAW264.7 cells and BMDMs. We assessed the inhibitory effect of pro-inflammatory cytokines, and the mRNA expressions of interleukin-6 (IL-6), tumor necrosis factor alpha (TNF-α), classical inflammatory pathways (MAPK and NF-κB), and the nuclear translocation factors AP-1 and NF-κB p65 were investigated. The in vivo anti-inflammatory effects of Safranal were assessed in a DSS-induced colitis model. DSS3.5% was used to induce colitis in mice with or without Safranal for 7 days; weight and disease activity index (DAI) were recorded daily. At the end of the experiment, the colon, mesenteric lymph nodes (MLNs), and spleen were collected for flow cytometry, ELISA, and Western blot analysis.
Results: Safranal suppressed NO production, iNOS, and COX-2 in lipopolysaccharide (LPS)-stimulated RAW264.7 cells and BMDMs. Safranal decreased the production and mRNA expression of IL-6 and TNF-α in the RAW264.7 cell line and inhibited the phosphorylation and nuclear translocation of components of the MAPK and NF-κB pathways. Safranal alleviated clinical symptoms in the DSS-induced colitis
model, and colon histology showed decreased severity of inflammation, depth of inflammatory involvement, and crypt damage. Immunohistochemical staining and flow cytometry showed reduced macrophage infiltration in colonic tissues andmacrophage numbers in MLNs and the spleen. The levels of colonic IL-6 and TNF-αalso decreased in Safranal-treated colitis mice. This study elucidates the anti inflammation activity of Safranal, which may be a candidate for inflammatory bowel syndrome (IBD) therapy.