استفاده از روش حساسیت مولی نسبی با استفاده از GC-FID برای تعیین کمیت سافرانال در زعفران (Crocus sativus L.)

سافرانال یکی از اجزای طعم دهنده زعفران است که به عنوان ادویه، افزودنی غذایی و داروی خام استفاده می شود. در ISO 3632، سافرانال به عنوان ترکیبی که به کیفیت زعفران کمک می کند، تعریف شده است و روش های تعیین کمی برای سافرانال گزارش شده است. با این حال، سافرانال فرار است و به راحتی در طول ذخیره سازی تجزیه می شود، و یک استاندارد تحلیلی با خلوص دقیق شناخته شده به صورت تجاری در دسترس نیست، که تعیین کمیت دقیق محتوای سافرانال در زعفران را دشوار می کند.

در اینجا، ما روشی را برای تعیین کمیت سافرانال با استفاده از حساسیت مولی نسبی (RMS)، به نام روش RMS، با استفاده از آشکارساز یونیزاسیون شعله GC (GC-FID) توسعه دادیم. ما RMS سافرانال را به 1،4-bis(trimethylsilyl)benzene-d4، یک ماده مرجع معتبر تجاری در دسترس، با ترکیبی از NMR کمی و کروماتوگرافی تعیین کردیم. با استفاده از دو ابزار GC-FID ساخته شده توسط سازندگان مختلف برای ارزیابی اثر بین ابزار، RMS حاصل 0.770 و تفاوت بین ابزار 0.6٪ بود.

محلول آزمایش، با غلظت سافرانال شناخته شده، با روش RMS، با دقت 99.4-101٪، تکرارپذیری 0.81٪، و تکرارپذیری 0.81-1.3٪ اندازه گیری شد. با توجه به سهولت تخریب، فراریت بالا و خلوص نامشخص معرف‌های سافرانال، روش RMS رویکرد کمی دقیق‌تری در مقایسه با روش منحنی کالیبراسیون و روش‌های مبتنی بر اسپکتروفتومتری جذبی است. علاوه بر این، یافته‌های ما نشان داد که گاز آرایشی GC-FID روی RMS و مقادیر کمی تأثیر می‌گذارد.

Safranal is one flavor component of saffron, which is used as a spice, food additive, and crude drug. In ISO3632, safranal is defined as the compound that contributes to the quality of saffron, and many quantitative determination methods for safranal have been reported. However, safranal is volatile and degrades easily during storage, and an analytical standard with an exact known purity is not commercially available, making it difficult to quantify accurately the content of safranal in saffron. Here, we developed a method for quantifying safranal using relative molar sensitivity (RMS), called the RMS method, using a GC-flame ionization detector (GC-FID). We determined the RMS of safranal to 1,4-bis(trimethylsilyl)benzene-d4, a certified reference material commercially available, by a combination of quantitative NMR and chromatography.

Using two GC-FID instruments made by different manufacturers to evaluate inter-instrument effect, the resultant RMS was 0.770, and the inter-instrument difference was 0.6%. The test solution, with a known safranal concentration, was measured by the RMS method, with an accuracy of 99.4–101%, repeatability of 0.81%, and reproducibility of 0.81–1.3%. Given the ease of degradation, high volatility, and uncertain purity of safranal reagents, the RMS method is a more accurate quantification approach compared to the calibration curve method and methods based on absorption spectrophotometry.

Moreover, our findings revealed that the GC-FID makeup gas affected the RMS and quantitative values.