یک روش سریع توالی‌ مخصوص مبتنی بر PCR در یک لوله برای احراز هویت زعفران در داروهای خام و فرآوری‌شده گیاهی

زعفران یکی از باارزش‌ترین گیاهان دارویی دنیا است و اغلب با مواد ارزان‌تر تقلبی می‌شود. ترکیبات شیمیایی موجود در Crocus sativus L. مانند کروکین و پیکروکروسین نیز در دیگر گیاهان وجود دارند، که باعث می‌شود تحلیل مبتنی بر نوع شیمیایی برای کنترل کیفیت زعفران مناسب نباشد. در این مطالعه، ما یک روش احراز هویت سریع برای زعفران در داروهای خام با استفاده از PCR موقعیت‌محور توسعه دادیم. برای دستیابی به تحلیل سریع و با ظرفیت بالا، یک روش شناسایی تک‌لایه‌ای با استفاده از رنگ فلورسانس یونیورسال برای شناسایی محصولات PCR نیز ایجاد شد. علاوه بر این، این روش برای احراز هویت زعفران در یک داروی گیاهی فرآوری شده به نام «Er shi wu wei shan hu wan» که شامل بیست و پنج نوع ماده دارویی از جمله گیاهان، مواد معدنی و حیوانات است نیز به کار گرفته شد. علاوه بر این، این روش ثابت شد که دارای ویژگی خاصیت بالا و تکرارپذیری خوبی است.انعطاف‌پذیری در انتخاب پرایمرهای مختلف همچنین این روش را برای سایر مواد دارویی متنوع کرد.

Saffron is one of the world’s most precious medicinal herbs and often found to be adulterated with other cheaper materials. The chemical compounds in Crocus sativus L. such as crocin, picrocrocin also exist in other plants, which makes the chemotype-driven analysis not ideal for the quality control of saffron. Herein, we developed a rapid authentication method for saffron in crude drugs by the site-specific PCR. In order to realize fast high-throughput analysis, a one-tube identification approach was further established by using a universal fluorescent dye to detect the PCR products. In addition, this method was also applied to the authentication of saffron in a processed herbal medicine “Er shi wu wei shan hu wan” which consists of twenty-five kinds of medicinal materials including plants, minerals and animals. Additionally, this method was also proved to be with high specificity and repeatability. The flexibility of choosing different primers also made this method versatile for other medicinal materials.