مدولاسیون بیان سیتوکین شبکیه توسط زعفران در یک مدل تجربی گلوکوم

هدف: بررسی اثر ضد التهابی عصاره زعفران، با تنظیم بیان سیتوکین‌ها و کموکین‌های دخیل در فرآیند التهاب عصبی منجر به آسیب سلول‌های گانگلیونی شبکیه (RGC)، در مدل موشی فشار خون چشمی ناشی از لیزر (OHT) یک طرفه.

روش‌ها: سه گروه از موش‌های آلبینو سوئیسی تحت درمان با عصاره زعفران استفاده شدند؛ گروه زعفران ساده (SNG)، گروه لیزر زعفران ۱ روزه (SLG1d) و گروه لیزر زعفران ۳ روزه (SLG3d). هر دو چشم مبتلا به OHT (درمان شده با فوتوکوآگولاسیون لیزری) و چشم مقابل آنها مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفتند. نمونه‌های شبکیه پردازش شدند و از کیت‌های چندآرایه‌ای (پنل مهره مغناطیسی سیتوکین/میوکین موش MILLIPLEX MAP) برای تعیین کمیت بیان موارد زیر استفاده شد: IL-1β، IL-4، IL-6، IL-10، IL-17، IFN-ϒ، TNF-α، فاکتور نوروتروفیک مشتق از مغز (BDNF)، فاکتور رشد اندوتلیال عروقی (VEGF) و Fractalkine. آنالیز ایمونوهیستوشیمی برای تعیین محل سلول‌های بیان‌کننده فاکتورها و سیتوکین‌های شناسایی شده در سنجش چندگانه انجام شد.

نتایج: پس از درمان با زعفران، هیچ تفاوت معنی‌داری در ۱ و ۳ روز پس از OHT ناشی از لیزر، بین غلظت سیتوکین‌های پیش‌التهابی (IL-1β، IFN-γ، TNF-α و IL-17)، سیتوکین‌های ضدالتهابی (IL-4 و IL-10)، BDNF، VEGF و فراکتالکین در هر دو چشم OHT و چشم مقابل آن، در مقایسه با زعفران طبیعی، مشاهده نشد. سطح IL-6 در چشم OHT در SLG1d به طور قابل توجهی افزایش یافت و در SLG3d در مقایسه با SNG به مقادیر طبیعی رسید. این نتایج برخلاف نتایج یافت شده در چشم‌های OHT و چشم مقابل آنها که با زعفران درمان نشده بودند، است که در آنها تغییراتی در سطح سیتوکین مشاهده شد. نتیجه‌گیری: زعفران در تنظیم تولید سیتوکین‌های پیش‌التهابی، VEGF و فراکتالکین ناشی از افزایش فشار داخل چشمی (IOP) مؤثر است و بنابراین از شبکیه در برابر آسیب‌های مرتبط با آن محافظت می‌کند. زعفران می‌تواند به عنوان درمان کمکی در درمان گلوکوم مفید باشد، بنابراین به کاهش روند التهابی که در این آسیب شناسی رخ می‌دهد، کمک می‌کند.

Purpose: To analyse the anti-inflammatory effect of saffron extract, by regulating the expression of cytokines and chemokines involved in the neuroinflammatory process leading to retinal ganglion cell (RGC) damage, in a mouse model of unilateral laser-induced ocular hypertension (OHT).

Methods: Three groups of Albino Swiss mice treated with saffron extract were used; saffron naïve group (SNG), saffron laser group 1 day (SLG1d) and saffron laser group 3 days (SLG3d). Both eyes with OHT (treated with laser photocoagulation) and their contralateral were analysed. Retinal samples were processed and multiarray kits (MILLIPLEX MAP Mouse Cytokine/Myokine Magnetic Bead Panel) were used to quantify the expression of: IL-1β, IL-4, IL-6, IL-10, IL-17, IFN-ϒ, TNF-α, Brain-derived Neurotrophic Factor (BDNF), Vascular Endothelial Growth Factor (VEGF) and Fractalkine. Immunohistochemical analysis was performed to locate cells expressing the factors and cytokines detected in the multiplex assay. Results: After saffron treatment, no significant differences were found, at 1 and 3 days after laser-induced OHT, between the concentration of proinflammatory cytokines (IL-1β, IFN-γ, TNF-α and IL-17), anti-inflammatory cytokines (IL-4 and IL-10), BDNF, VEGF, and fractalkine in both the OHT eye and its contralateral eye, compared to saffron naïve. IL-6 levels increased significantly in the OHT eye in SLG1d, reaching normal values at SLG3d compared to SNG. These results are contrary to those found in OHT eyes and their contralateral not treated with saffron, in which changes in cytokine levels were observed.

Conclusions: Saffron is effective in regulating the production of proinflammatory cytokines, VEGF, and fractalkine induced by increased IOP, thus protecting the retina from its related damage. Saffron could be beneficial as coadjutant therapies in the treatment of glaucoma, thus helping to decrease the inflammatory process that occurs in this pathology.