بهینه‌سازی استخراج روغن حاوی فلفل سفید، فلفل بلند، دارچین، زعفران و مورت با دی‌اکسیدکربن فوق بحرانی و اثرات محافظتی آن در برابر محرومیت از اکسیژن-گلوکز در سلول‌های PC12

این مطالعه به منظور بررسی کارآمدترین روش استخراج روغن برای درمان سکته و اثرات محافظتی آن بر روی مدل محرومیت از اکسیژن و گلوکز در سلول‌های PC12 انجام شد. یک طراحی آزمایشی متعامد L9 (3^4) برای بهینه‌سازی روغن با استخراج سیال فوق بحرانی CO2 انجام شد. از برمید تترازولیوم و آزمون جذب نوری سنجش شده برای ارزیابی فعالیت سلولی و شاخص‌ها در لیزار سلولی استفاده شد. نتایج نشان داد که شرایط بهینه استخراج 30 مگاپاسکال، 50 درجه سانتی‌گراد و 100 دقیقه است. عصاره‌ها با کروماتوگرافی گازی-طیف‌سنجی جرمی تجزیه و تحلیل شدند و از بین چهل ترکیب شناسایی شده، 27 ترکیب شناسایی شد که 80.86٪ از کل محتوای روغن را نشان می‌دهند. ترانس-سینامآلدهید (14.14٪)، پیپرین (9.32٪)، β-آمیرین (6.79٪)، لوپنون (6.28٪)، لونگیفولن (6.07٪)، β-کاریوفیلن (5.21٪)، α-بیزابولول (4.11٪) و β-بیزابولن (2.56٪) جزء ترکیبات با درصد جرمی بالا بودند. روغن به طور قابل توجهی می‌تواند آسیب سلولی PC12 را کاهش دهد، آزادسازی لاکتات دهیدروژناز را کاهش داده و سطوح مالون دی آلدئید، فعالیت گلوتاتیون پراکسیداز و نیکوتین آمید آدنین دینوکلئوتید فسفات اکسیداز، محتوای گلوتاتیون و اکسید نیتریک را کاهش داده (p < 0.01) و سطح سوپراکسید دیسموتاز را پس از محرومیت از اکسیژن و گلوکز افزایش دهد. مکانیسم محافظتی ممکن است مربوط به اثر آنتی‌اکسیدانی روغن با از بین بردن رادیکال‌های آزاد باشد.

This study is to investigate the most efficient extractives of extracting oil recipe for stroke treatment and the protective effects on an oxygen and glucose deprivation model in PC12 cells. An orthogonal experimental design L9 (3^4) was carried out for oil recipe’s optimization with supercritical CO2 fluid extraction. 2-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide and enzyme-linked immunosorbent assay were conducted to evaluate cell activity and indexes in the cell lysate. The result showed that the optimum extraction condition was 30 Mpa, 50 °C, 100 min, the extracts were analyzed by gas chromatography-mass spectrometry and among forty detected compounds 27 were identified, representing 80.86% of the total oil content. trans-Cinnamaldehyde (14.14%), piperine (9.32%), β-amyrin (6.79%), lupenone (6.28%), longifolene (6.07%), β-caryophyllene (5.21%), α-bisabolol (4.11%), and β-bisabolene (2.56%) were high mass fraction. Oil recipe could significantly attenuate PC12 cell damage, the lactate dehydrogenase release and decreased the malondialdehyde levels, glutathione peroxidase and nicotinamide adenine dinucleotide phosphate oxidase activity, glutathione and nitric oxide content (p < 0.01) and increased the level of superoxide dismutase after oxygen and glucose deprivation. The protective mechanism may be related to oil recipe’s antioxidant effect by scavenging free radicals.