افزودن مکمل کروستین به رقیق‌کننده منی، کیفیت منی قوچِ سردشده را در طول مدت نگهداری طولانی‌مدت حفظ می‌کند.

منی قوچ به شدت در معرض شوک سرمایی است که باعث آسیب برگشت‌ناپذیر به یکپارچگی و سیالیت غشاها می‌شود. منی سرد معمولاً ظرف 24 ساعت پس از جمع‌آوری استفاده می‌شود. با این حال، اگرچه نگهداری آن در دمای 5 درجه سانتیگراد طول عمر منی را افزایش می‌دهد، اما اغلب به دلیل تجمع گونه‌های فعال اکسیژن (ROS) با افت کیفیت همراه است. این مطالعه پتانسیل کروسین، یک کاروتنوئید با خواص آنتی‌اکسیدانی، را برای بهبود کیفیت منی قوچ سرد شده که در دمای 5 درجه سانتیگراد تا سه روز در رقیق‌کننده مبتنی بر لسیتین سویا حاوی دو غلظت کروسین (0.5 و 1 میلی‌مولار) نگهداری شده بود، ارزیابی کرد. تحرک اسپرم، زنده‌مانی، سطح گلوتاتیون، بیان پروتئین‌های دخیل در پاسخ به استرس گرمایی (HSR) و آپوپتوز در فواصل 24 ساعته ارزیابی شد. کروسین تحرک (تا روز 1)، زنده‌مانی (تا روز 2) و پارامترهای سینماتیکی (تا روز 3) را حفظ کرد. علاوه بر این، کروسین سطح گلوتاتیون و Hsp70 درون سلولی را افزایش داد و سطوح آپوپتوز را به صورت وابسته به دوز مهار کرد، که نشان دهنده نقش آنتی‌اکسیدانی و محافظت سلولی کروسین است. علیرغم اینکه 0.5 میلی‌مولار تا روز اول مؤثر بود، 1 میلی‌مولار کروسین ظرفیت آنتی‌اکسیدانی را افزایش داد، مکانیسم‌های پاسخ به استرس را تعدیل کرد و کیفیت اسپرم را در طول نگهداری در یخچال تا روز سوم حفظ کرد و پتانسیل آن را به عنوان یک افزودنی ارزشمند به رقیق‌کننده‌های اسپرم قوچ برجسته کرد.

Ram semen is highly susceptible to cold shock, which induces irreversible damage to the integrity and fluidity of membranes. Chilled semen is commonly used within 24 h of collection. However, while its storage at 5 °C extends semen lifespan, it is often accompanied by quality deterioration due to accumulation of reactive oxygen species (ROS). This study evaluated the potential of crocin, a carotenoid with antioxidant properties, to improve the quality of chilled ram semen stored at 5 °C for up to three days in a soybean lecithin–based extender supplemented with two crocin concentrations (0.5 and 1 mM). Sperm motility, viability, glutathione levels, the expression of proteins involved in the heat stress response (HSR), and apoptosis were assessed at 24 h intervals. Crocin preserved motility (up to Day 1), viability (up to Day 2,) and kinematic parameters (up to Day 3). In addition, crocin enhanced intracellular glutathione and Hsp70 levels and inhibited apoptotic levels dose-dependently, indicating the antioxidant and cytoprotective role of crocin. Despite 0.5 mM being effective up to Day 1, 1 mM crocin augmented antioxidant capacity, modulated stress response mechanisms, and preserved sperm quality during chilled storage up to Day 3, highlighting its potential as a valuable additive of ram semen extenders.