مجموعه ای جامع از روش های qPCR برای ارزیابی تقلب در ادویه ها و گیاهان شاخص

مصرف کنندگان و شرکت های مرتبط با مواد غذایی یا دارویی به ادویه ها و گیاهان به اشکال مختلف متکی هستند. زنجیره‌های تامین پیچیده، قیمت‌های بالا و تولید کم حجم، آنها را در برابر شیوه‌های تقلب آسیب‌پذیر می‌کند. با این حال، روش‌های جامع برای شناسایی متجاوزان نادر است و آزمایشگاه‌های کنترل ملی را از اجرای قوانین اروپایی و ملی بازمی‌دارد. در این مطالعه، ما روش‌های کمی PCR (qPCR) را ارائه می‌کنیم که برای شناسایی پنج عامل تقلبی برتر هر یک از شش ادویه و سبزی رایج مصرفی: پاپریکا/فلفل، زردچوبه، زعفران، زیره، پونه کوهی و فلفل سیاه طراحی شده‌اند. ویژگی هر روش با تجزیه و تحلیل qPCR مجموعه بزرگی از گونه های گیاهی مربوطه تایید شد. هر نمونه معتبر با پنج عامل اصلی تقلبی مربوطه ترکیب شد که در طرح کنترل هماهنگ اتحادیه اروپا روی گیاهان و ادویه ها در سال 2021 یا در ادبیات موجود شناسایی شده است. این مخلوط‌های دوتایی برای ارزیابی عملکرد روش با توجه به حساسیت، خطی بودن و صحت در چهار سطح غلظت مواد تقلبی استفاده شد. تشخیص نیز در نمونه های چند تقلبی مورد بررسی قرار گرفت. این روش‌های qPCR مبتنی بر SYBR™ سبز، تشخیص خاص مواد تقلبی را امکان‌پذیر می‌سازد و حساسیت آن‌ها امکان تمایز بین آلودگی غیرعمدی و تقلب عمدی را فراهم می‌کند. در مجموع، این روش ها به حفظ اصالت این کالاهای با ارزش کمک می کنند.

Consumers and companies associated with food or pharmaceuticals rely on spices and herbs in various forms. Their intricate supply chains, elevated prices, and low-volume production render them vulnerable to fraudulent practices. However, comprehensive methodologies to detect adulterants remain scarce, impeding national control laboratories from enforcing European and national legislation. In this study, we present quantitative real-time PCR (qPCR) methods designed to identify the top five adulterants of each of six commonly consumed spices and herbs: paprika/chili, turmeric, saffron, cumin, oregano and black pepper. The specificity of each method was confirmed by qPCR analysis of a large collection of relevant plant species. Each authentic sample was combined with its respective top five adulterants as identified in the European Union-wide coordinated control plan on herbs and spices in 2021 or in the existing literature. These binary mixtures were used to evaluate the method’s performance with respect to sensitivity, linearity and trueness at four levels of adulterants concentration. Detection was also investigated in multi-adulterated samples. These SYBR™ Green-based qPCR methods enable the specific detection of adulterants, and their sensitivity allows for the distinction between inadvertent contamination and deliberate adulteration. Altogether, these methods contribute to safeguard the authenticity of these high-value commodities.