تشخیص تقلب زعفران با عصاره گاردنیا از طریق تعیین جنیپوزید با روش کروماتوگرافی مایع-طیف‌سنجی جرمی

اخیراً روشی جدید و پیشرفته تقلب زعفران با گیاه زیتون‌ک (gardenia) در بازار زعفران اروپا کشف شد. در این پژوهش، یک روش تحلیلی بر پایه کروماتوگرافی مایع متصل به اسپکترومتری جرمی (quadrupole-time of flight) برای شناسایی تقلب در نمونه‌های زعفران با گیاه زیتون‌ک، از طریق تعیین ژنیپوزید به عنوان نشانگر تقلب، توسعه داده شد. یک ستون C18 با هسته‌ی مذاب (fused-core) با استفاده از شستشوی هم‌اکنش (isocratic) شامل آب و استونیتریل با نسبت حجمی ۸۵ به ۱۵ حاوی ۰.۱٪ اسید فرمیک به کار گرفته شد. پس از بهینه‌سازی شرایط اسپکترومتری جرمی، ویژگی‌های تحلیلی مربوط به تعیین ژنیپوزید در حالت یون‌زایی الکترواسپری منفی ارزیابی شد. در نتیجه، امکان تشخیص تا ۱۰ نانوگرم بر میلی‌لیتر ژنیپوزید پس از مرحله رقیق‌سازی ۵۰ برابری عصاره زعفران فراهم گردید (حد تشخیص ۴۱.۷ میکروگرم ژنیپوزید به ازای هر گرم نمونه تحلیل شده؛ معادل تا ۰.۰۰۴٪ تقلب). روش توسعه‌یافته LC–MS برای تحلیل نمونه‌های مختلف زعفران اصیل و مشکوک به کار رفت.

A new and sophisticated saffron adulteration method with gardenia was recently discovered in the European saffron market. In this work, an analytical methodology using liquid chromatography-(quadrupole-time of flight)-mass spectrometry has been developed for the detection of the adulteration of saffron samples with gardenia through the determination of geniposide as an adulteration marker. A fused-core C18 column was employed using an isocratic elution with water:acetonitrile (85:15 v/v) containing 0.1% formic acid. After optimization of the mass spectrometry conditions, the analytical characteristics related to the determination of geniposide in negative electrospray ionization mode were evaluated. Then, it was possible to detect up to 10 ng/mL geniposide after a dilution step of 50-fold of the saffron extract (LOD of 41.7 μg of geniposide per gram of sample analyzed (i.e up to 0.004%)). The developed LC–MS methodology was applied to the analysis of different authentic and suspicious saffron samples.