ارزیابی فعالیت سیتوتوکسیک کروسین و سافرانال بر کارسینوم سلول سنگفرشی دهان (رده سلولی KB)

کروکین و سافرانال مواد مؤثره موجود در زعفران هستند. برخی مطالعات، فعالیت‌های ضدتوموری ترکیبات زعفران را نشان داده‌اند. هدف از این مطالعه، ارزیابی اثرات سیتوتوکسیک کروکین و سافرانال بر سلول‌های کارسینوم صفحه‌ای دهان (سلول‌های KB) و خط سلولی NIH 3T3 به‌عنوان سلول‌های غیربدخیم بود. سلول‌ها در دمای ۳۷ درجه سانتی‌گراد به مدت ۲۴، ۴۸ و ۷۲ ساعت با کروکین و سافرانال انکوبه شدند و حیات سلولی با استفاده از آزمون MTT کمّی‌سازی گردید. سلول‌های آپوپتوتیک، توزیع چرخه سلولی و بخش زیر-G1 با استفاده از رنگ‌آمیزی یدید پروپیدیوم و تفکیک DNA توسط سیتومتری فلوسی تعیین شدند. کروکین (۰.۰۵-۴ میلی‌مولار) و سافرانال (۰.۲-۳.۲ میلی‌مولار)، رشد سلول‌های KB را به‌طور معنادار مهار کردند (اثرات مهار رشد همه غلظت‌ها برای هر دو بعد از ۷۲ ساعت بیش از ۵۰٪ بود)، در حالی که اثرات کمتری بر حیات سلول‌های NIH 3T3 داشتند. مقادیر IC50 کروکین و سافرانال علیه سلول‌های NIH 3T3 پس از ۷۲ ساعت به ترتیب ۲.۸ و ۰.۳ میلی‌مولار تعیین شد. کروکین و سافرانال یک پیک زیر-G1 را در نمودار سیتومتری فلوسی سلول‌های تحت درمان نسبت به سلول‌های کنترل القا کردند که نشان‌دهنده درگیر بودن مرگ سلولی آپوپتوتیک در سمیت کروکین و سافرانال است. اثرات آپوپتوتیک کروکین و سافرانال در سلول‌های توموری بیشتر از سلول‌های طبیعی بود. نه کروکین و نه سافرانال، پیشرفت چرخه سلولی را تحت تأثیر قرار ندادند. کروکین و سافرانال در خط سلولی KB، اثرات آپوپتوتیک اعمال کردند.

Crocin and safranal are active ingredients in the saffron. Some studies have demonstrated antitumor activities of saffron ingredients. The aim of this study was to evaluate cytotoxic effects of crocin and safranal in oral squamous cell carcinoma (KB cells) and NIH 3T3 cell line as nonmalignant cells. The cells were incubated with crocin and safranal at 37°C for 24, 48, and 72 h, and cell viability was quantitated by MTT assay. Apoptotic cells, cell cycle distribution, and sub-G1 fraction were determined using propidium iodide staining of DNA fragmentation by flow cytometry. Crocin (0.05–4 mM) and safranal (0.2–3.2 mM) significantly inhibited the growth of KB cells (the inhibitory growth effects of all concentrations for both were >50% after 72 h), while they had less inhibitory effects on NIH 3T3 cells viability. The IC50 values of crocin and safranal against NIH 3T3 cells after 72 h were determined as 2.8 and 0.3 mM, respectively. Crocin and safranal induced a sub-G1 peak in the flow cytometry histogram of treated cells compared to control cells indicating that apoptotic cell death is involved in the toxicity of crocin and safranal. Apoptotic effects of crocin and safranal in tumor cells were more than normal cells. Neither crocin nor safranal affected the cell cycle progression. Crocin and safranal exerted apoptotic effects in KB cell line.