Csa-miR160، سرکوب‌کننده رونویسی CsARF18 را هدف قرار داده و بیوسنتز کروستینِ تحت‌کنترل اکسین را در *Crocus sativus* L. تنظیم می‌کند.

اکسین نقش تنظیمی محوری در رشد و نمو گیاه و متابولیسم ثانویه ایفا می‌کند. کروسین‌ها ترکیبات کلیدی مسئول اثرات دارویی زعفران هستند و میزان آن‌ها در اثر تیمار با IAA (نوعی اکسین) کاهش می‌یابد؛ با این حال، مکانیسم زیربنایی این تنظیم همچنان نامشخص است. در این مطالعه، ما یک فاکتور پاسخ به اکسین به نام ARF18 را شناسایی کردیم که بیان ژن آن توسط IAA القا می‌شود و همبستگی منفی با بیوسنتز کروسین دارد. خاموش‌سازی CsARF18 منجر به افزایش محتوای کروسین شد، در حالی که بیان بیش‌ازحد (Overexpression) آن کاهش محتوای کروسین را در پی داشت. مشخص شد که CsARF18 به توالی‌های پاسخ به اکسین (AuxREs) در نواحی پروموتور ژن‌های CsPSY1 و CsALDH5 متصل شده و در نتیجه رونویسی آن‌ها را مهار می‌کند. علاوه بر این، میکروRNAی Csa-miR160 به عنوان تنظیم‌کننده CsARF18 شناسایی شد که تخریب آن را تسهیل می‌کند. بیان همزمان و بیش‌ازحد Csa-miR160 و CsARF18 در گیاه *Crocus sativus* L. اثر بازدارنده CsARF18 بر بیوسنتز کروسین را تعدیل کرد، در حالی که خاموش‌سازی Csa-miR160 نتوانست این مهار را کاهش دهد. نتایج ما نشان می‌دهد که Csa-miR160 با هدف قرار دادن و تخریب CsARF18، اثر تنظیمی بازدارنده آن بر CsPSY1 و CsALDH5 را تضعیف می‌کند. بر اساس این یافته‌ها، ما مدل تنظیمی «CsARF18–CsPSY/CsALDH–crocin» را پیشنهاد می‌کنیم که در آن Csa-miR160 سیگنال‌دهی اکسین را در طول بیوسنتز کروسین در *C. sativus* تعدیل می‌نماید. این مطالعه بستری برای تحقیقات بیشتر در زمینه متابولیت‌های ثانویه زعفران فراهم می‌کند.

Auxin plays a central regulatory role in plant development and secondary metabolism. Crocins are key compounds responsible for the pharmacological effects of saffron, and their content is reduced by exogenous IAA. However, the mechanism underlying this regulation remains unclear. In this study, we identified an auxin response factor, ARF18, whose gene expression is induced by IAA and negatively correlates with crocin biosynthesis. Silencing of CsARF18 resulted in increased crocin content, whereas overexpression of CsARF18 led to a decrease in crocin content. CsARF18 was shown to bind to AuxREs within the promoters of CsPSY1 and CsALDH5, consequently inhibiting their transcription. Furthermore, the microRNA Csa-miR160 was identified as a regulator of CsARF18, promoting its degradation. Co-overexpression of Csa-miR160 and CsARF18 in Crocus sativus L. alleviated the inhibitory effect of CsARF18 on crocin biosynthesis, whereas silencing Csa-miR160 failed to alleviate this inhibition. Our results demonstrate that Csa-miR160 targets and degrades CsARF18, thereby weakening its inhibitory regulation on CsPSY1 and CsALDH5. Based on these findings, we propose the “CsARF18–CsPSY/CsALDH–crocin” regulatory model, in which Csa-miR160 modulates auxin signaling during crocin biosynthesis in C. sativus. This study lays the foundation for further research on the secondary metabolites of saffron.