متابولومیکس کمی زعفران ایرانی بر اساس HPLC-DAD و MALDI-TOF-MS

بیش از ۸۵٪ زعفران (Crocus sativus L.) در ۲۲ منطقه از ایران تولید می‌شود. کنترل کیفیت و تأثیرات جغرافیایی آن اصلی‌ترین نگرانی در این زمینه است. در این مطالعه، اثر انگشت کروماتوگرافی ۲۲ نوع زعفران از ۲۲ منطقه ایران توسعه یافت. روش‌های خوشه‌بندی چندمتغیره PCA و HCA برای یافتن شباهت‌ها و تفاوت‌ها در سه طول موج ۴۴۰، ۳۰۸، ۲۵۴ استفاده شد که منجر به تقسیم نمونه‌ها به کلاس‌های مختلف بر اساس اثر انگشت‌های HPLC آن‌ها شد. سپس به عنوان یک روش قابل اعتماد، حساس و سریع آنالیز، MALDI-TOF-MS برای تعیین همزمان کروسین‌ها، سافرنال و پیکروکروسین معرفی شد. در نهایت و بر اساس مقررات کمیته بین‌المللی هماهنگی (ICH) برای اعتبارسنجی پارامترهای روش‌های تحلیلی، بازه خطی برای کروکین‌ها، پیکروکروسین و سافرنال به ترتیب در محدوده ۲۲-۲۰۰، ۳۲-۲۰۰ و ۲۲-۱۰۰ نانوگرم/نقطه به دست آمد.همچنین حد کمّی‌سازی (LOQ) برای کروسین‌ها، پیکروکروسین و سافرنال به ترتیب ۷.۱۸، ۱۰.۷۱ و ۶.۷۶ نانوگرم بر نقطه بود. در نهایت، این مطالعه MADLI-TOF را به عنوان یک روش بسیار سریع و قابل اعتماد برای پروفایل‌سازی کمی متابولیت‌های گیاهان دارویی معرفی می‌کند.

More than 85% of saffron (Crocus sativus L.) is producing in 22 regions of Iran. Quality control and its geographical effects are the main concern behind it. In this study, we developed a chromatographic fingerprint of 22 type saffron from 22 regions of Iran. Multivariate clustering methods of PCA and HCA are used for finding similarities and dissimilarities in three wavelengths 440, 308, 254 lead to the samples divided into different classes based on their HPLC fingerprints. Then as a reliable, sensitive and fast method of analysis, MALDI-TOF-MS introduced for simultaneous determination of crocins, safranal and picrocrocin. Eventually and according to the International Committee of Harmonization (ICH) regulation for the validation of analytical methods parameters including linearity range for Crocins, Picrocrocin and Safranal were obtained at the range of 22-200, 32-200 and 22-100 ng/spot respectively. Also limit of quantification (LOQ) for crocins, picrocrocin and safranal were 7.18, 10.71 and 6.76 ng/spot respectively. Finally, this work is introducing MADLI-TOF as a very fast and reliable method for quantitative metabolites profiling of medicinal plant.