“ارزیابی آنزیم‌های تخریب دیواره سلولی گونه‌های Fusarium مرتبط با ریشه و کورم زعفران “

هدف این مطالعه شناسایی گونه‌های فوزاریوم مرتبط با ریشه و غده زعفران و ارزیابی فعالیت آنزیم‌های خارج‌سلولی ترشح‌شده توسط آن‌ها است. به‌منظور مطالعه گونه‌های فوزاریوم، در مجموع ۵۳ نمونه ریشه و غده به‌صورت تصادفی از مزارع زعفران در استان خراسان جنوبی در طول فصل رشد ۲۰۱۷ جمع‌آوری شد. پس از شستشوی نمونه‌ها با آب استریل و ضدعفونی کردن سطح با ۱٪ هیپوکلریت سدیم، قطعات کوچک ریشه و غده بر روی محیط‌های کشت عمومی و خاص کشت داده شدند. پاک‌سازی کلنی‌های قارچی با استفاده از روش‌های اسپور تک و نوک هایفایی بر روی محیط آگار آبی ۲٪ انجام شد. شناسایی قارچ‌ها بر اساس ویژگی‌های میکروسکوپی و مورفولوژیکی با استفاده از کلیدهای شناسایی معتبر انجام شد.

گونه‌های F. oxysporum، F. graminearum، F. culmorum و F. proliferatum بر اساس ویژگی‌های مورفولوژیکی شناسایی شدند.نتایج به‌دست‌آمده از تجزیه و تحلیل مولکولی با استفاده از پرایمرهای خاص گونه تأیید کننده شناسایی مورفولوژیکی است. نتایج نشان می‌دهند که ۲۲.۶٪ از نمونه‌های زعفران آلوده به گونه‌های فوزاریوم هستند. F. oxysporum گونه غالب با بالاترین فرکانس جداسازی در نمونه‌ها به میزان ۹.۴٪ است و پس از آن F. culmorum (۵.۷٪)، F. proliferatum (۳.۸٪) و F. graminearum (۳.۸٪) بر اساس مشاهدات مورفولوژیکی و مولکولی قرار دارند.

The aim of this study is to identify Fusarium species associated with root and corm of saffron and evaluate extracellular enzyme activity secreted by them. In order to study the species of Fusarium, a total of 53 root and corm samples were randomly collected from saffron fields of the South Khorasan province during 2017 growing season. After washing the samples with sterile water and disinfected the surface with 1% sodium hypochlorite, small pieces of root and corm were cultured on general and specific culture media. Purification of fungal colonies was performed using single spore and hyphal tip methods on 2% water agar medium.

Identification of fungi based on the microscopic and morphological characteristics was performed with valid identification keys. The F. oxysporum, F. graminearum, F. culmorum and F. proliferatum species were identified based on morphological characters. The results obtained from molecular analysis using species-specific primers confirm morphological identification. The results reveal that 22.6% of saffron samples are contaminated by Fusarium species. F. oxysporum is the predominant species with the highest isolation frequency in samples of 9.4% followed by F. culmorum (5.7%), F. proliferatum (3.8%) and F. graminearum (3.8%) based on morphological and molecular observations.