“تأثیر امواج فراصوت، دما، نور، کیتوسان و تنظیم‌کننده‌های رشد گیاهی بر کالوس‌زایی زعفران “

“زعفران به عنوان گیاهی چندساله و تریپلوئید به دلیل داشتن متابولیتهای ثانویه ارزشمند، یکی از مهمترین گیاهان دارویی دنیا محسوبمیشود. مطالعه ی حاضر با هدف ارزیابی عوامل مختلف )نوع اکسین، امواج فراصوت، دما، نور و کیتوسان( بر کالوسزایی و رشد کالوس در ریزنمونه های بنه زعفران در قالب دو آزمایش انجام شد.

در آزمایش اول تأثیر امواج فرا صوت و نوع اک سین مورد برر سی قرار گرفت. بدینمنظور بنههای زعفران پس از ضدعفونی به ق سمتهای مساوی تقسیم و پس از تیمار با امواج فرا صوت، روی محیط ک شت MS حاوی -1همراه به( 2,4-D و NAA( اکسککین 2 mg.l-1l.mg 2 Kin کشت شدند. در آزمایش دوم، تأثیر درجه حرارت، کیتوسان و روشنایی بطورجداگانه بر کالوسزایی و رشد کالوس مورد ارزیابی قرار گرفت.

نتایج تجزیه واریانس نشان داد که بین تیمارها از نظر درصد کالوسزاییو وزن تر کالوس در ماه دوم و سوم پس از کشت تفاوت معنی داری وجود دارد. محیط کشت MS حاوی-1 Kin + 2 mg.l-1 0.5 mg.l0.5 mg.lNAA از نظر در صد کالوسزایی و ر شد کالوس ریزنمونه های بنه زعفران در مقای سه با محیط کشت MS حاوی 2 + Kin 1-l.mg از کارایی باجتری برخوردار بود. در محیط کشت MS حاوی D-4,2 که درصد کالوسزایی و رشد کالوس پایین بود، استفاده-1 2,4-Dاز تیمار زخم زنی با استفاده از تیمار امواج فراصوت باعث تقویت رشد کالوس گردید. در آزمایش دوم نیز درصد کالوسزایی و رشد ریزنمونهها در محیطکشت حاوی NAA بطور معنیداری بیشتر از D-4,2 بود. علاوه براین در آزمایش دوم، در محیط کشت MS حاوی D-4,2 استفاده 1 -از کیتو سان با غلظت l.g 25/0 باعث تحریک القای کالوس گردید و فراوانی کالوسزایی ریزنمونههای بنه زعفران در این محیط ک شت را 1 -افزایش داد، ولی افزایش غلظت کیتوسکککان از به 0/25 g.l-1l.g 75/0 کالوسزایی و رشکککد کالوس را کاهش داد.

در حالی که در محیط ک شت MS حاوی NAA که از کارایی کالوسزایی و ر شد کالوس باجیی برخوردار بود، ا ستفاده از ا ستفاده از کیتو سان، کالوسزایی و ر شد کالوس بنه زعفران را کاهش داده اسککت. بطورکلی، بیشککترین درصککد کالوسزایی در محیط کشککت MS حاوی NAA در دمای ºC 25 و تاریکی بدست آمد که برای مطالعات کشت درونشیشهایی و مهندسی ژنتیک زعفران قابل توصیه است”

“Saffron is one of the most important pharmaceutical plants in the world due to its valuable secondary metabolites. The aim of this study is to investigate the different factors on callus induction and growth in saffron corm explants.

In the first experiment, saffron corms surface were sterilized and were excised to equal segments, then they were treated with ultrasound and then they were cultured on MS medium supplemented with 2 mg.L-1auxin (NAA and 2,4-D) and 0.5 mg.L -1 Kinetin. In the second experiment, the effect of temperature, light and chitosan were evaluated. The results of analysis of variance showed that there were significant differences (P≤0.05) among temperature, light, chitosan as well as ultrasound treatments in terms of callus induction percentage and fresh weight of callus.

Callus induction and growth on MS medium containing 2 mg.L-1 NAA + 0.5 mg.L-1 Kin was higher than those containing 2 mg.L-1 2,4-D +0.5 mg.L-1 Kin. In MS medium containing 2,4-D which had low callus induction and callus growth rate,utilization of ultrasound stimulated callus induction and especially it stimulated callus growth from saffron corm explants. In addition, in MS medium containing 2,4-D, utilization of 0.25 g.L-1chitosan stimulated callus induction and increased callus induction of saffron corm explants. However, increasing chitosan concentration from 0.25 mg.L-1to 0.75 g.L-1 decreased callus induction and callus growth, while, in MS medium containing NAA, which had efficient callus induction and growth, utilization of these treatments reduced callus induction and callus growth from saffron corm explants.

In other words, the effect of ultrasound and chitosan on response of saffron explants in vitro cultures was used, depending on the type of auxin used in composition of the culture medium. Generally, the highest percentage of callus induction occurred on MS medium supplemented with 2mg.L -1 NAA + 0.5 mg.L-1 Kin and incubated at 25 ºC in the dark, which could be suitable for in vitro culture and gene transfer studies in saffron.”