اولین گزارش پوسیدگی بنه زعفران ناشی از Penicillium chrysogenum در چین

در آگوست 2020، بررسی زعفران در این منطقه انجام شد و لکه‌های سیاه روی حدود 10٪ از گیاهان مشاهده شد. ویژگی‌های بیماری به شرح زیر بود: پایین پیاز در شیار تیره شده بود و لکه‌های سیاه پراکنده پس از جدا شدن برگ‌های فلس‌دار غشایی قابل مشاهده بودند. محل اتصال ضایعات و قسمت‌های سالم قهوه‌ای روشن بود. شناسایی مولکولی قارچ با تکثیر PCR ناحیه فاصله‌گذار رونویسی داخلی (ITS) از rDNA و ژن β-توبولین به ترتیب با استفاده از آغازگرهای ITS1/ITS4 (وایت و همکاران 1990) و TUB2Fd/TUB4Rd انجام شد. توالی‌های ITS (MW881446) و β-توبولین (MW911464) عامل بیماری‌زا مشابه توالی‌های ITS (MN592912) و β-توبولین (KY469126) اپی‌تیپ Penicillium citreosulfuratum با 99.81 و 99.56 درصد شباهت بودند. بر اساس ویژگی‌های ریخت‌شناسی و مولکولی، جدایه MF3 به عنوان P. citreosulfuratum شناسایی شد. برای آزمایش بیماری‌زایی، قارچ روی محیط کشت PDA کشت داده شد و به مدت 5 روز در دمای 28 درجه سانتیگراد انکوبه شد. سپس شاخه‌های میسلیومی (با قطر 5 میلی‌متر) روی زخم‌های مربعی برش اسکالپل روی بنه‌های ضدعفونی‌شده سطحی تلقیح شدند و بنه‌های تلقیح‌شده آزمایشی فقط شاخه‌های PDA دریافت کردند. نتایج نشان داد که بنه‌های تلقیح‌شده با P. citreosulfuratum بیماری با علائم مشابه در مزرعه ایجاد کردند. هیچ علائم بیماری در بنه‌های شاهد مشاهده نشد. جداسازی مجدد از بنه‌های تلقیح شده انجام شد و تمام قارچ‌های جداسازی مجدد شده به عنوان P. citreosulfuratum تأیید شدند و این قارچ بر اساس اصول کخ به عنوان عامل بیماری‌زا تأیید شد. تا آنجا که ما می‌دانیم، این اولین گزارش از پاتوژن عامل بیماری لکه سیاه زعفران است. اگرچه این بیماری برای زعفران کشنده نیست، اما تا حدودی باعث کاهش تولید محصول می‌شود. علاوه بر این، بیماری‌زایی این پاتوژن برای سایر گونه‌های گیاهی گزارش نشده است.

In August 2020, a survey of saffron was conducted in this area, and black spots were observed on about 10% of plants. Characteristics of the disease were as follows: The bottom of the corm was darkened in the groove, and scattered black spots could be observed after peeling off the membranous scale leaves. The junction of lesions and healthy parts was light brown. Molecular identification of the fungus was made by PCR amplification of the internal transcribed spacer (ITS) region of rDNA and β-tubulin gene using primers ITS1/ITS4 (White et al. 1990) and TUB2Fd/TUB4Rd, respectively. The ITS (MW881446) and β-tubulin (MW911464) sequences of pathogen were similar to the ITS (MN592912) and β-tubulin (KY469126) sequences of the epitype of Penicillium citreosulfuratum with 99.81 and 99.56% identity, respectively. According to the morphological and molecular characterization, the isolate MF3 was identified as P. citreosulfuratum. For pathogenicity testing, the fungus was grown on PDA and incubated at 28°C for 5 days. Then mycelial plugs (5 mm diameter) were inoculated on the scalpel incision square wounds of surface-disinfected corms, and mock-inoculated corms received only PDA plugs. The results showed that corms inoculated with P. citreosulfuratum developed disease with similar symptoms as in the field. No disease symptoms were observed on control corms. Reisolations were performed from inoculated corms, and all reisolated fungi were confirmed as P. citreosulfuratum, verifying the fungus as the pathogen based on Koch’s postulates. To our knowledge, this is the first report of the pathogen causing black spot disease of saffron. Although the disease is not fatal to saffron, to a certain extent it will cause a reduction in the production of the crop. In addition, this pathogen has not been reported to be pathogenic to other plant species.