“اثرات زعفران بر الگوی بیان ژن‌های خودنوزایی حیاتی در رده سلولی تومور آدنوکارسینوم (AGS) “

زمینه :هدف از مطالعه کنونی تعیین تأثیرات غلظت‌های مختلف عصاره زعفران (Crocus sativus) بر بیان برخی از ژن‌های خودتجدیدی از جمله OCT4، KLF، SOX2، NANOG و Nucleostemin در خط سلولی AGS (آدنوکارسینوم معده) بود. مواد و روش‌ها: سلول‌های AGS در محیط RPMI1640 که حاوی زعفران (۲۰، ۴۰ و ۱۰۰ میکروگرم در میلی‌لیتر) بود، به مدت ۲۴، ۴۸ و ۷۲ ساعت کشت شدند. مهار تکثیر سلولی با استفاده از MTT ارزیابی شد. درصد سلول‌های آپوپتوتیک با انجام تجزیه و تحلیل سیتومتری فلویی با استفاده از کیت تشخیص آپوپتوز Annexin V/PI تعیین گردید. RNA کل سلولی استخراج و به سنتز cDNA تحت ‌شد و سپس، بیان ژن‌های مورد نظر استخراج و در هر دو گروه کنترل و آزمایش، با استفاده از RT-PCR (تکثیر ژن در زمان واقعی) بررسی شد. داده‌ها با استفاده از آزمون‌های t دانشجویی و اندازه‌گیری مکرر تحلیل شدند. تفاوت‌ها در صورت (P < 0.01) معنادار در نظر گرفته شدند.

یافته‌ها: تفاوت قابل توجهی در زنده‌مانی سلول مشاهده شد، زمانی که غلظت‌های مختلف زعفران برای 24، 48 و 72 ساعت انکوباسیون استفاده شد و آپاپتوز به طور وابسته به زمان افزایش یافت. نتایج فلوی سیتومتری افزایش واضح و قابل توجهی را در سلول‌های آپاپتوتیک AGS نشان داد. یافته‌های مبتنی بر PCR در زمان واقعی ما نشان داد که تقطیر زعفران بیان ژن‌های OCT4، KLF، SOX2، NANOG و Nucleostemin را در مقایسه با سلول‌های کنترل درمان‌نشده کاهش داده است. نتیجه‌گیری : بر اساس نتایج این مطالعه می‌توان نتیجه‌گیری کرد که تقطیر زعفران می‌تواند به عنوان بازدارنده‌ای از تقسیم سلولی در نظر گرفته شود و به همین ترتیب پیشرفت سرطان را مهار کند.

“Background
The aim of the current study was to determine the effects of various concentrations of saffron distillate (Crocus sativus) on expression of some self-renewal genes including OCT4, KLF, SOX2, NANOG and Nucleostemin in AGS (gastric adenocarcinoma) cell line.
Material and methods
The AGS cells were cultured in RPMI1640 medium contained saffron (20, 40 and 100 μg/mL) for 24, 48 and 72 h. Inhibition of cell proliferation was assessed by MTT. The percentage of apoptotic cells was determined by flow cytometry analysis using Annexin V/PI apoptosis detection kit. Total cellular RNA extracted and subjected to and cDNA synthesis and then, the expression of the desired genes was extracted and subjected to in both the control and test groups, using real time- PCR (RT-PCR). Data were analyzed by student t and repeated measure tests. Differences were considered significant if (P < 0.01).
Findings
There was a significant difference in cell viability, when various concentrations of saffron were used for 24, 48 and 72 h of incubation and apoptosis increased in a time-dependent manner. Flow cytometry results exhibited an obviously significant augmentation in apoptotic AGS cells. Real time- PCR our RT-PCR based findings indicated that saffron distillate has reduced the expression of OCT4, KLF, SOX2, NANOG and Nucleostemin genes in compare to untreated control cells.
Conclusion
According to the results of this study it may be concluded that saffron distillate can be considered as an inhibitor of cell division and regardingly inhibit cancer progression.”